测定法的灵敏度来自作为报告的酶。众所周知，酶是一种有机催化剂，很少量的酶即可诱导大量的催化反应，产生可供观察的显色反应现象。因此该体系常被称为酶放大体系。
1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。 24μg/ml 5号标准品 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
12μg/ml 4号标准品 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
6μg/ml 3号标准品 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
3μg/ml 2号标准品 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
1.5μg/ml 1号标准品 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液
2. 加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。|
3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7. 温育：操作同3。
8. 洗涤：操作同5。
9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
ADAR1 (C-terminus) 双链RNA腺苷酸脱氨基酶抗体（C端）
AF10 髓系、淋巴、混合系白血病易位基因10抗体
ADCY1 腺苷酸环化酶1抗体
APC 腺瘤样息肉抗体
AGPAT1 溶血磷脂酰基转移酶抗体
ANKS3 锚蛋白重复及SAM结构域蛋白3抗体
phospho-ALK (Tyr1586) 磷酸化间变型淋巴瘤激酶抗体
ACADVL 酰基辅酶A脱氢酶很长链抗体
AMSH 信号转导衔接结合蛋白抗体
ASB3 锚蛋白重复序列-细胞因子信号抑制物盒蛋白家族3抗体
Aurora C 有丝分裂激酶B抗体
Phospho-Ack1 (Tyr284) 磷酸化Ack1抗体
Phospho-Ack1 (Tyr326) 磷酸化Ack1抗体
Phospho-beta-Arrestin 1 (Ser412) 磷酸化β抑制蛋白1抗体
Phospho-Aurora A (Thr288) 磷酸化有丝分裂激酶A抗体
phospho-APS(Ser598) 磷酸化APS抗体
Aurora A 有丝分裂激酶A抗体
AIM2 干扰素诱导蛋白AIM2抗体
Aquaporine 2 水通道蛋白-2抗体
ABI2 肿瘤抑制基因ABI2/精氨酸酪氨酸蛋白激酶结合蛋白抗体
ARL11 ADP核糖基化因子样11抗体
ARMCX3 ARM重复X连锁蛋白ARMCX3抗体
ARMCX1 ARM重复X连锁蛋白ARMCX1抗体
ARMCX2 ARM重复X连锁蛋白ARMCX2抗体
Apg10 自噬相关蛋白10抗体
ACBD6 酰基辅酶A结合结构域蛋白6抗体
Aminoacylase 1 氨基酰化酶1抗体
Adipose Triglyceride Lipase 脂肪甘油三酯脂酶抗体
phospho-AMPK alpha-1 (Thr172) 磷酸化腺苷单磷酸活化蛋白激酶α1抗体
Amphiregulin 双调蛋白（结肠直肠细胞源性生长因子）抗体
phospho-AQP2(Ser264) 磷酸化水通道蛋白2抗体
AXL 粘附相关激酶抗体
