人可溶性细胞间粘附分子1ELISA试剂盒实验原理
发表时间：2025-06-10
人可溶性细胞间粘附分子1（sICAM-1）ELISA试剂盒采用双抗体夹心法进行检测，其核心原理是通过特异性抗体捕获样本中的目标蛋白，再借助酶标记的二抗与底物反应产生信号，实现定量分析。
实验过程中，首先将包被有抗sICAM-1单克隆抗体的微孔板与待测样本孵育，样本中的sICAM-1会与固相抗体结合形成免疫复合物。洗板去除未结合物质后，加入生物素标记的检测抗体，该抗体与sICAM-1的另一表位结合，形成“抗体-抗原-抗体”夹心结构。随后，加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的链霉亲和素，通过生物素-亲和素的高亲和力结合，进一步放大检测信号。
最后，加入显色底物TMB，在HRP催化下产生蓝色产物，其颜色深浅与样本中sICAM-1浓度成正比。终止液终止反应后，溶液变为黄色，用酶标仪在450nm波长下测定吸光度值，通过标准曲线即可计算出样本中sICAM-1的精确浓度。
该方法灵敏度高、特异性强，可广泛应用于炎症、肿瘤、心血管疾病等研究领域，为探索sICAM-1在疾病发生发展中的作用提供可靠工具。
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