ELISA（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay）是一种常见的免疫学检测技术，可用于检测血清、唾液、尿液等生物样本中的蛋白质、抗体等分子。该技术基于特异性抗原与抗体的结合反应，利用酶标记的二抗或底物进行检测。ELISA有直接ELISA、间接ELISA、竞争ELISA等不同类型，具有高灵敏度、特异性和可重复性，广泛应用于医学、生命科学、环境监测等领域。
那ELISA实验结果不如预期是什么原因呢
（1）低信号/阴性结果：
? 样品处理问题：可能存在样品稀释不当、保存不当、存在干扰物质等。
? 抗体质量问题：使用的抗体可能与目标物质结合不充分或不特异。
? 实验操作问题：可能存在洗涤不彻底、孵育时间过短等实验操作不准确的问题。
（2）高背景/假阳性结果：
? 阻断问题：阻断步骤不充分，导致非特异性结合。
? 抗体交叉反应：使用的抗体可能与其他非目标物质发生交叉反应。
? 样品污染：存在非特异性的样品污染，如细胞碎片、大量蛋白质等。
（3）结果变异性：
? 实验条件问题：实验条件（如温度、湿度、孵育时间）的不一致性可能导致结果的变异性。
? 实验重复性问题：可能存在实验操作的差异或者试剂批次的差异，影响结果的一致性。
（4）非线性结果：
? 标准曲线问题：标准曲线的制备可能存在误差，导致浓度计算不准确。
? 高浓度样品稀释问题：如果使用高浓度的样品进行稀释，稀释比例选择不当可能导致非线性结果。
