1. 分装保存:避免反复冻融损耗
?痛点?:未分装的荧光抗体冻融3次后,流式检测信号强度下降30%,因冻融导致荧光素脱落,抗体结构破坏。
?优化策略?:
初次使用前按实验单次用量分装(50-100μL/管),使用低吸附冻存管,减少抗体黏附损耗。
标签管理:冻存管标注“抗体名称-标记物-宿主-浓度-批号-分装日期”
案例:未分装的抗体反复冻融后活性下降,导致ELISA实验信号不稳定,分装后信号重复性显著提高。
2. 效价预实验:优化工作浓度避免信号偏差
?痛点?:直接使用推荐浓度导致信号过强或过弱,浪费样本。
?优化策略?:
?ELISA/WB?:以1:500、1:1000、1:2000梯度稀释,绘制信号-浓度曲线,选择线性区间中点作为工作浓度。
?IHC?:从1:100开始,结合组织类型调整(如肝脏等蛋白酶丰富组织需降低浓度)。
案例:使用推荐浓度进行WB实验,条带过强导致信号饱和,稀释后条带清晰且定量准确。