MPC-83细胞的培养其实不难，关键掌握好这几个核心步骤：
一、培养基与环境
?培养基?：89% 1640 + 10% FBS + 1% 双抗
?环境?：37℃、5% CO?、湿度70%-80%
二、复苏与传代
?复苏?：37℃水浴解冻后离心，用完全培养基重悬
?传代?：细胞长到80%密度时，用PBS润洗后胰酶消化，离心后按1:2比例分瓶
三、冻存与保存
?冻存液?：90%血清 + 10% DMSO
?降温?：-20℃ 1.5h → -80℃过夜 → 液氮长期保存
四、异常情况处理
五、注意事项
?无菌操作?：全程严格消毒
?消化控制?：胰酶时间1-2分钟，避免过度
?碎片处理?：运输后可离心去除碎片
