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人可溶性白细胞分化抗原14ELISA试剂盒间接法(检测未知抗体)

 

人可溶性白细胞分化抗原14ELISA试剂盒间接法(检测未知抗体):

1、用包被缓冲液将已知抗原稀释至1-10ug/ml, 每孔加0.1ml,4℃过夜。次日洗涤3次。

2、加样:加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.05ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤。(同时做空白、阴性及阳性孔对照)

3、加酶标抗体:于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标*抗体(抗抗体)0.05ml,37℃孵育30-60分钟,洗涤,*一遍用DDW洗涤。

4、加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分钟。

5、终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml

6、结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。

mCF, 小鼠心脏成纤维细胞
MN-c, 小鼠皮质神经元
 细胞名称
人绒毛膜毛细血管内皮细胞
人羊膜上皮细胞
人绒毛间充质成纤维细胞
人羊膜间充质基质细胞
人绒毛膜间充质基质细胞
 细胞名称
NRK-52E,大鼠肾细胞
H9c2大鼠心肌细胞(ATCC来源)
NIH/3T3, 小鼠成纤维细胞系
大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)
HSC-T6, 大鼠肝星状细胞系
CHO, 中国仓鼠卵巢细胞系
COS-7L, 非洲绿猴肾成纤维细胞
SF9, 昆虫卵巢细胞
BRL 3A, 大鼠肝正常细胞
HK-2, 人肾皮质近曲小管上皮细胞
HET-1A, 人食管上皮细胞
RGC-5, 小鼠视网膜神经节细胞
GC-1, 鼠精原细胞


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